1.商品介绍(原理,技术优势,应用场景)
激光共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy, LSCM)是一种高分辨、三维、非侵入式的成像技术,广泛应用于生命科学、材料科学和医学研究。其核心优势在于通过“共聚焦”原理,有效排除离焦光干扰,从而显著提高图像的清晰度和对比度。
(1)激光共聚焦显微镜的基本原理
共聚焦技术
点光源照明:使用激光作为点光源,通过照明针孔聚焦后照射样品,仅激发焦平面上一个微小区域。
空间滤波:激发出的荧光信号沿原路返回,经过探测针孔后由光电倍增管(PMT)或高灵敏度探测器接收。非焦平面的光被针孔屏蔽,仅焦平面的光信号被有效收集。
逐点扫描:通过扫描振镜系统,激光束在样品表面逐点、逐行扫描,形成二维图像。
三维成像:通过Z轴步进马达或压电陶瓷驱动样品或物镜,沿光轴方向采集不同焦平面的二维图像,再经计算机重建为三维结构。
(2)技术优势
高分辨率:横向分辨率可达120~200 nm,轴向分辨率可达500 nm左右,远超传统荧光显微镜。
高对比度:有效消除背景噪音和离焦光干扰,显著提高图像对比度。
非侵入式:对活体细胞和组织损伤极小,可实现长时间动态观察。
多色荧光成像:可同时使用多种荧光探针,进行多通道成像和共定位分析。
(3)应用场景
生命科学:细胞内结构三维重建、细胞器动态追踪、蛋白质定位、细胞内钙离子浓度动态监测、pH值变化、细胞凋亡过程、细胞迁移与侵袭研究。
神经科学:神经网络三维重建、突触结构观察、神经元可塑性研究、脑组织切片高分辨率成像。
发育生物学:胚胎发育过程实时追踪、细胞命运决定、器官形成机制研究。
医学研究:肿瘤微环境研究、药物作用机制、组织病理学分析、肿瘤转移机制。
材料科学:材料表面三维形貌与粗糙度分析、微纳结构表征、材料表面缺陷检测、荧光材料性能评估。
药物研发:药物在细胞内分布、到药物载体(如纳米颗粒、脂质体)的细胞摄取与释放过程、药物毒性评估。
2.结果案例

3.仪器参数
技术参数
Technical Parameters
放大倍数:12.5-40000倍
载物台:电动载物台,行程130 mmx85 mm
横向分辨率:120nm
观察方式:明场、高级暗场、偏光观察方式
4.送样要求
(1)菌液/污泥/污水类样品
样品量:5000rpm离心10min,可得到绿豆大小沉淀,(1.5 mL离心管)大小的菌体沉淀
②细菌类需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。
③蛋白/多糖类染色,一般加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,样品不和冰袋接触。
④污泥类样品可以进行冰切或者刀切.
(2) 样品处理方法(生物膜)
①样品量:金属/瓷砖/岩石等块体类建议长宽高尺寸不超过1cm,薄膜类直径尺寸不超过2cm;且均要求样品表面平整,需要标出拍摄面。
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触③若在爬片上培养生物膜,可将爬片粘于培养皿底部充满培养基,封口膜密封完全,再4度保存。
(3)植物类
①植物类样品可进行简单冰切及刀切,软化等特殊类请走病理组织切片测试项目②一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触③做过的植物类样品淀粉、叶片、根、茎,拟南芥等。